酸棗粒種苗，大青棗苗用什么苗木稼接
發(fā)布時間：2022-08-20 05:18
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大青棗苗用什么苗木稼接還行吧酸棗是嫁接臺灣青棗的砧木。2，怎么種酸棗苗能打佛落靈嗎是氟樂靈，是選擇性芽前土壤處理劑，易揮發(fā)、易光解、水溶劑極小，不易在土層中移動。主要通過雜草的胚芽鞘與胚軸吸收。對……
1，大青棗苗用什么苗木稼接
2，怎么種酸棗苗能打佛落靈嗎
是氟樂靈，是選擇性芽前土壤處理劑，易揮發(fā)、易光解、水溶劑極小，不易在土層中移動。主要通過雜草的胚芽鞘與胚軸吸收。對已出土雜草無效。對禾本科和部分小粒種子的闊葉雜草有效，持效期長。 只要酸棗苗已出土，可以進行土壤處理。
3，藥用植物離體培養(yǎng)再生植株是什么
（孫國棟）一、培養(yǎng)再生植株的意義以植物組織培養(yǎng)為主要手段的植物生物技術，包括五個分支領域，即用離體技術改良植物品種，經濟植物的快速繁殖，超低溫種質保存，植物細胞的大量培養(yǎng)和植物遺傳工程。在藥用植物離體培養(yǎng)中，除了植物細胞的大量培養(yǎng)外，其余都涉及到再生植株的培養(yǎng)。和一般的植物不同，培養(yǎng)藥用植物再生植株需要注意藥用成分的變化。（一）快速繁殖通過離體技術大量培養(yǎng)再生植株可以達到快速繁殖的目的，主要用于：（1）自然繁殖率低的植物；（2）性狀不一致的雜合植物，（3）資源稀少的瀕危植物；（4）新培育的優(yōu)良品種；（5）優(yōu)良芽變品種和性狀好的優(yōu)選單株；（6）國外引入的少量植物材料；（7）育種過程中需要迅速擴大的某些自交系、原始材料、雜種子代；（8）組織培養(yǎng)或自然條件下獲得的三倍體與多倍體植物；（9）除去病原菌（真菌、細菌、病毒）的植物?？焖俜敝臣夹g能否應用取決于：（1）培養(yǎng)技術簡易、穩(wěn)定、完善；（2）成本低于常規(guī)方法；（3）具有一定的設備條件和技術力量；（4）市場需要，價格適宜。如羅漢果、石斛。（二）脫毒植株通過莖尖培養(yǎng)，或者通過花瓣培養(yǎng)和愈傷組織長期培養(yǎng)，獲得除去主要病毒的脫毒植株，用它作為母株繼續(xù)繁殖，可以得到大量無病毒種苗，用于大田生產，可以提高產量和質量，防止品種退化。如地黃、菊花。（三）種質保存在4℃低溫或在液氮的低溫中，植物組織和細胞的生活力可以長期保持?？捎糜诶鋬霰４娴闹参锊牧嫌校海?）莖尖和側生分生組織；（2）培養(yǎng)的植物細胞和胚狀體；（3）原生質體；（4）植物器官，如胚、胚乳、子房、花藥、花粉和種子等。冷凍保存植物材料，可以節(jié)省人力、地力和物力。便于地區(qū)間和國際間種質交流，通過試管繁殖提供育種的原始材料和無病毒種苗。（四）品種改良用離體技術改良植物品種的方法主要有：（1）通過花藥、花粉、未受精子房、胚珠等培養(yǎng)獲得單倍體植株，進行單倍體育種；（2）通過胚乳培養(yǎng)獲得三倍體植株，或在植物組織培養(yǎng)中，通過秋水仙或其它因素處理獲得多倍體植株；（3）通過體細胞無性系變異和細胞突變體篩選，以獲得具有優(yōu)良性狀的變異體和突變體；（4）原生質體培養(yǎng)和細胞雜交。不論采用何種育種技術，都必須誘導再生植株，并對后代進行鑒定。如人參、枸杞。（五）植物基因工程植物基因工程包括基因分離、載體系統和受體系統三個組成部分。它直接用控制性狀遺傳的基因作為操作對象，可以更精確地定向改良品種，目前分離和克隆的基因有20余種。載體系統主要在研究膿桿菌的Ti質粒系統（agrobacterium tumerfaciens T-DNA）。作為受體系統，可以采用原生質體，懸浮培養(yǎng)的細胞，愈傷組織離體的植物器官或整體植株。無論采用何種受體系統，都必須使轉化的細胞再生為完整植物，植株再生是植物基因工程的一個主要環(huán)節(jié)。如龍葵、菘藍。二、植株再生的基本原理生物界普遍存在再生現象，生物再生是自然選擇和人工選擇的結果。通常低等生物具有較強的再生能力，神經系統愈發(fā)達的高等動物，再生能力愈弱。在植物中，細胞、組織和器官，在離體培養(yǎng)條件下，可以生長和發(fā)育，形成完整植株。但是，不同種植物，或者同種植物不同品種，甚至同一植物不同組織和器官的細胞，再生能力也有差別。通常野生植物比栽培植物再生能力強，無性繁殖的植物強于種子繁殖的植物。植株再生的基礎在于細胞具有遺傳全能性，即每一個細胞含有產生一個完整有機體的全部遺傳信息，在適當的條件下，一個具有全能性的活細胞，其發(fā)育和分化，受其DNA上面的部分基因的被活化或阻抑所控制，一個細胞可以形成一個完全新的有機體。在離體培養(yǎng)物上再生植株，是離體培養(yǎng)物的細胞在各種環(huán)境因子的刺激和作用下，經過脫分化和再分化的結果。可能由于植物細胞分化狀況僅有相對的穩(wěn)定性，在離體培養(yǎng)中，特異化的細胞比較容易經脫分化恢復全能性，全能性的脫分化細胞經過再分化，產生完整的小植株。其中分化是植株再生的中心問題，和許多因素有關。植物激素是化學信使，作為基因表達的“效應子”，對RNA和蛋白質的合成起直接影響，在細胞脫分化和再分化的過程中起著重要的、有時是決定性的作用。雖然許多問題還非常不清楚，但是，植株再生的基本原理，目前認為是：（1）植物細胞全能性；（2）植物細胞的脫分化和再分化；（3）植物激素的平衡作用。這些基本原理，既是組織培養(yǎng)的一般指導原則，也是一些有待于深入研究的基本理論課題。三、植株再生的基本途徑從離體培養(yǎng)物上再生植株，存在兩條形態(tài)發(fā)生的基本途徑，即器官發(fā)生和胚胎發(fā)生。這兩種形態(tài)發(fā)生，有的經過愈傷組織階段，有的則直接產生于離體的母體組織。（一）器官發(fā)生器官發(fā)生途徑是通過器官分化形成完整植株，如貝母、藏紅花、紫背天葵、蘆薈。離體培養(yǎng)物的器官分化，包括不定芽、不定根、鱗莖、球莖、塊莖、原球莖以及花的形成。通過不定芽和不定根形成再生植株，有三種方式：（1）先形成芽，而后在芽上產生根；（2）先形成根，而后在根上產生芽；（3）在愈傷組織上同時產生芽和根，以后芽和根之間形成維管系統，連結成統一的軸狀結構。大多數情況為第一種方式。通過鱗莖、球莖、塊莖、原球莖等器官分化，也有不同情形。在植物組織培養(yǎng)中，雖然通過器官發(fā)生途徑再生植株的研究報道很多，但是有關基礎研究的資料仍很貧乏。大多數的研究繼續(xù)集中在外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件這三類因子調控作用的經驗性操作。在大多數情況下，人們僅能觀察已經表現出來的分化狀態(tài)，而很難跟蹤分化的過程。與形態(tài)發(fā)生的起源和方向有關的因素，目前的認識還很模糊，在這些因素中，包括有離體培養(yǎng)體系中各類物質的變化和相互作用，這些物質來自培養(yǎng)基、外植體及其培養(yǎng)過程中的代謝產物。在離體培養(yǎng)中，只有少量的細胞被啟動，而且起始是不同步的。Torrey（1966）提出擬分生組織假說，形態(tài)發(fā)生起始于愈傷組織中形成的分生細胞團，即擬分生組織。在培養(yǎng)體系內各種因子的作用下，由擬分生組織產生不同的原基，由于作用因子的性質不同，或者形成根，或者形成芽，或者發(fā)育為胚狀體。擬分生組織可能發(fā)生于組織與培養(yǎng)基的界面，其形成部位可能決定于從培養(yǎng)基向組織擴散的物質造成的生理梯度。Skoog和Miller等提出激素平衡假說，認為器官分化和細胞分裂素與生長素的比例有關。在大多數情況下，生長素與細胞分裂素的高比值，利于根形成，而相反的比值利于芽的發(fā)生。由于外植體內源激素的存在和抑制物質的累積，也有不少相反的情況。在實際應用這一原則時，有時需要增加或省略某一類植物激素，對下述因素作出必要的考慮：（1）植物激素的種類和組合；（2）植物激素的絕對濃度；（3）植物激素，主要是細胞分裂素和生長素的比例；（4）植物激素的順序效應；（5）其它因素的影響，如外植體、營養(yǎng)條件、碳源種類和濃度以及其它理化因素。（二）胚胎發(fā)生從胚胎發(fā)生途徑再生植株是先形成胚狀體，通過胚狀體萌發(fā)而形成完整的小植株。在高等植物中胚狀體的發(fā)生是一個普遍現象，現在已觀察到40多科150多種植物具有胚胎發(fā)生能力。關于胚狀體的概念，朱澂提出（1978），胚狀體是植物組織培養(yǎng)中起源于非合子細胞，經過胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過程形成的胚狀結構。這個定義包括下列幾點含義：（1）胚狀體是組織培養(yǎng)的產物，只限于在組織培養(yǎng)范圍內使用，區(qū)別于無融合生殖的胚；（2）胚狀體起源于非合子細胞，區(qū)別于合子胚；（3）胚狀體的形成經歷胚胎發(fā)育的過程，區(qū)別于組織培養(yǎng)中分化的芽體。胚狀體的來源可以分為五類：（1）組織器官；（2）愈傷組織；（3）游離單細胞；（4）小孢子；（5）原生質體。其中有的起源于單細胞，有的起源于多細胞。胚狀體發(fā)生方式有兩種（Sharp et al，1980）：（1）直接發(fā)生：胚狀體形成不經過愈傷組織，直接來自離體培養(yǎng)組織中預決定胚性細胞（Preembryogenic determined cell）；（2）間接發(fā)生：胚狀體發(fā)生經過愈傷組織，從愈傷組織的誘導決定胚性細胞（Induced-embryogenic determined cell）發(fā)育而成。在培養(yǎng)體系有關因子的作用下，胚性細胞不斷分裂和增殖，形成胚性細胞團，進而發(fā)育成球形胚。通常胚性細胞較小，核大，細胞質濃厚，富有大的淀粉粒。球形胚組織可以與周圍組織分離，和合子胚發(fā)育過程相似，由球形胚發(fā)育分化為心形胚、魚雷形胚和具有子葉的成熟胚狀體。成熟的胚狀體形態(tài)和合子胚相似，具有胚根、胚芽和子葉。在分化培養(yǎng)基上，胚狀體像種子一樣萌發(fā)，胚軸伸長，葉片展開，發(fā)育根和形成葉綠素，多種器官再進一步生長形成小植株。由于胚狀體的形成，導致了人工種子的研制。從胚狀體發(fā)生到植株形成是一個連續(xù)過程，可以分為三個連續(xù)階段：（1）胚狀體的起源；（2）胚狀體的分化；（3）胚狀體萌發(fā)生長，形成小植株。在實際操作中，胚性細胞的誘導及其形成胚狀體的發(fā)育過程，可能在同一個培養(yǎng)基上形成，或者分別需要經過兩次培養(yǎng)。胚狀體形成綠色植株，則需要轉至分化培養(yǎng)基。如果培養(yǎng)基中的化學物質，主要是植物激素的不平衡。胚性細胞的分化和胚狀體的發(fā)育會受到抑制，而發(fā)生畸形胚性組織塊。這些畸形結構也可能具有胚胎發(fā)生潛力。胚胎發(fā)生與植物激素的關系因植物而異，可有幾種類型：1.專一性生長素型胚胎發(fā)生必須有生長素存在，其它植物激素的存在起抑制作用。這種類型又有兩種情況：（1）誘導胚性細胞必須有生長素，胚狀體形成和發(fā)育，則需要降低或者去除生長素，如胡蘿卜；（2）胚狀體誘導和發(fā)育可在同一生長素培養(yǎng)基上進行。如人參。2.非專一性生長素型胚胎發(fā)生需要生長素，其它植物激素，如細胞分裂素、赤霉素或脫落酸，在一定配比下有協同作用，如酸棗。3.非生長素型胚胎發(fā)生不需要生長素，可在細胞分裂素培養(yǎng)基上形成，如檀香。4.非激素型胚胎發(fā)生不需要植物激素，如曼陀羅花藥培養(yǎng)。胚狀體分化綠苗，通常需要降低或去除生長素，而細胞分裂素、赤霉素具有主要作用，如人參、西洋參。在體細胞胚胎發(fā)生中，還原態(tài)氮化物具有重要作用。還原態(tài)氮化物包括無機氮，如NH+4；有機氮化物，如氨基酸、酰胺、水解酪蛋白等。在通常情況下，還原態(tài)氮化物有利于胚狀體的發(fā)生，但是作用機理并不清楚，不同植物反應也不相同。許多研究表明，生長素和還原態(tài)氮化物的濃度比例可能起著重要作用。不同植物不同離體培養(yǎng)物再生植株的途徑可能不同，有的主要通過器官發(fā)生途徑，如煙草，有的很容易發(fā)生胚狀體，如胡蘿卜。但是許多植物再生植株，既可以通過器官發(fā)生途徑，也可以通過胚胎發(fā)生途徑，植物激素可以進行調控，如人參、西洋參等。通常誘導芽體分化需要細胞分裂素，誘導胚狀體發(fā)生則生長素起重要作用。在離體培養(yǎng)物上分化芽體和胚狀體，它們的主要區(qū)別在于：芽體具有單極性，與離體培養(yǎng)物有維管組織聯系，根和芽不同時產生；胚狀體具兩極性，即有根端（胚根）和莖端（胚芽），與離體培養(yǎng)物無直接聯系，是一個完整的植物體雛形。由于體細胞胚胎發(fā)生研究的進展，導致了人工種子的研制。四、植株再生的限制因素（一）植株再生的限制因素在離體培養(yǎng)物上再生植株，可以分為外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件三類調控因子。在這三類因子中，雖然它們的作用都很重要，但是比較起來，植株再生能否成功，限制因素主要不在于培養(yǎng)基，而在于培養(yǎng)材料本身，即培養(yǎng)材料細胞全能性的表達程度。1.遺傳型（基因型）的影響不同植物種之間再生能力有很大差別，有的再生能力很強，如茄科、傘形科、十字花科等；有的再生比較困難，如豆科植物。同一種植物不同品種再生能力也有不同。由于遺傳型的影響，決定了植株再生的難易程度和應用前景。我們在研究五加科藥用植物人參、西洋參、三七和刺五加種胚培養(yǎng)再生植株時，得到下述結果：（1）在附加BA2mg/l+NAA0.5mg/l的培養(yǎng)基上，人參和西洋參種胚培養(yǎng)物可以直接啟動芽分化，轉入含有赤霉素的培養(yǎng)基上則形成不定芽，而三七和刺五加則無芽體分化。（2）在有生長素的培養(yǎng)基上，這四種藥用植物種胚培養(yǎng)物上均有胚狀體發(fā)生，但是對生長素的種類和濃度反應不同。在附加2，4-D0.5—1.0mg/l時，胚胎發(fā)生能力依次為：西洋參＞人參＞刺五加，而三七未觀察到胚胎發(fā)生。在含有IAA的培養(yǎng)基上，高濃度的IAA促進人參種胚體細胞胚胎發(fā)生，而三七和刺五加則以低濃度IAA為宜。（3）在上述的生長素條件下，人參和西洋參為間接胚胎發(fā)生，而三七和刺五加為直接胚胎發(fā)生。2.外植體的來源在離體培養(yǎng)中，可用作培養(yǎng)的材料很多，包括器官、組織，甚至單細胞。雖然植物細胞具有全能性，但它的表達可能僅限于某些特殊的細胞，這些細胞可能預先存在于外植體中，或者產生于培養(yǎng)過程之中。許多實驗表明，培養(yǎng)材料的特性，不僅影響再生的可能性，而且影響植株增長速率和植株的品質。在選用培養(yǎng)材料時可以觀察到，分生組織易于分化，子葉基部再生較強，成年樹木的葉片，可能逆轉性較差，細胞全能性難以表達。我們在研究西洋參離體培養(yǎng)再生植株時，不同外植體來源的愈傷組織，細胞全能性的表現程度不同（表13—10）。表13—10 西洋參不同外植體愈傷組織細胞全能性的表現程度3.外植體的狀況外植體的發(fā)育階段和年齡，外植體內源激素和生理狀態(tài)（取材季節(jié)），外植體大小，外植體的預處理，以及母體植株的質量等均影響植株再生的能否成功。在選擇外植體時，需要了解植物的生物學特性。（二）外植體的種類和選用在離體培養(yǎng)中，可供外植體的材料多種多樣，可以根據研究目的、再生途徑和實驗經驗進行選用。1.帶芽的外植體包括莖頭、側芽、原球莖、鱗莖等，這類外植體產生的植株成功率較高，變異性較小，容易保持材料的優(yōu)良特性，通常用于快速繁殖和培養(yǎng)無病毒植株（莖尖培養(yǎng)）。在培養(yǎng)時，為了誘導莖軸伸長，在培養(yǎng)基中多附加有生長素和赤霉素；如果誘導腋芽生長以產生叢生芽，在培養(yǎng)基中常含有大量的細胞分裂素。2.由分化的組織構成的外植體包括莖段、葉片、根等營養(yǎng)器官；花莖、花瓣、花萼、花藥、子房，胚珠、果實等生殖器官。這類外植體在培養(yǎng)過程中通常形成愈傷組織，通過器官發(fā)生和胚胎發(fā)生途徑再生植株。通過器官發(fā)生途徑再生植株，通常選用在自然條件下能產生不定芽的器官組織，這要根據不同植物的特性加以選擇，例如蘆薈選用莖段，菊花選用花瓣，百合選用鱗片等。通過胚胎發(fā)生途徑，常選用胚、幼嫩花序、分生組織等作外植體。這類外植體再生植株變異性較大，可用于無性系變異和突變體篩選，或者用于單倍體育種，如花粉植株。3.由遺傳轉化的細胞構成的外植體主要是指冠癭瘤轉化系統和直接DNA轉化系統，用于植物遺傳工程。五、再生植株的培養(yǎng)方法（一）再生植株的培養(yǎng)步驟1.建立無菌培養(yǎng)物這一步驟包括選取外植體，材料表面滅菌和在培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)。能否得到無菌培養(yǎng)物，首先決定于植物材料的狀況，應盡可能使用在培養(yǎng)室或溫室栽種的生長健康旺盛的材料。田間材料滅菌比較困難，常采用下述方法：（1）用抗菌素溶液和殺菌劑預處理植株；（2）用塑料袋包裹枝條；（3）采回枝條扦插，利用新生的芽；（4）對培養(yǎng)材料進行多次滅菌。有一些植物的外植體在接種后和培養(yǎng)過程中發(fā)生褐變，可以選用一些抗氧化劑、解毒劑或吸附劑加入到培養(yǎng)基中，如檸檬酸、抗壞血酸，及半胱氨酸、聚乙烯吡咯烷酮、二硫蘇糖醇、促長啉、氯胺丁、二乙基二硫代氨基甲酸酯、活性炭等，以改善褐變情況。2.愈傷組織的培養(yǎng)愈傷組織是植物組織培養(yǎng)中最常遇到的一個階段，為了快速繁殖遺傳性一致的優(yōu)良株系，使變異小于3%，需要盡量避免愈傷組織，然而在品種改良方面，誘導愈傷組織是有益的。愈傷組織通常產生于外植體傷口的表層細胞。愈傷組織的生長特性取決于植物材料、培養(yǎng)基和環(huán)境條件，從外植體到愈傷組織建立，大體上經歷誘導、細胞分裂和分化階段。在外界條件尤其是植物激素的作用下，少數細胞被啟動，新陳代謝加強，而進入活躍的細胞分裂，外植體細胞逆轉為分生組織，或脫分化為愈傷組織。愈傷組織的生長沒有明顯的極性，只有內外的生長陡度，外圍的細胞分裂和生長快于內部細胞。第三個時期，愈傷組織出現細胞分化和產生某些次生代謝產物。愈傷組織最重要的特征是可以通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生形成根、芽和胚狀體，進而形成小植株。愈傷組織通常表現為淡黃色、白色、綠色，有的含有花色素苷形成的顏色。愈傷組織有松散型和緊密型。同一來源的愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經過人工篩選，可以得到不同的細胞系，它們在細胞分化程度、顏色、生長速度、對營養(yǎng)條件和激素條件的要求、合成特殊物質的能力等方面有很大的差異。變異是愈傷組織另一個重要特征。這些變異有表現型變異和基因型變異。基因型變異可能有倍性變化，染色體畸變、基因序列變化。通過對有益變異的選擇可以用于品種改良。從外植體形成愈傷組織，與植物激素的關系大致有下述情況：（1）僅需要生長素；（2）僅需要細胞分裂素；（3）需要生長素和細胞分裂素；（4）不需要植物激素。在大多數情況下，生長素是誘導愈傷組織的主要因子。在培養(yǎng)過程中，由于營養(yǎng)逐漸耗盡，瓊脂失水逐漸變干，代謝產物累積而使毒性提高，愈傷組織培養(yǎng)一段時間需要轉移至新鮮培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng)，在固體培養(yǎng)基上，一般4—6周繼代培養(yǎng)一次。轉移的培養(yǎng)體，大約5—10mm，重20—100mg左右（Street，1969）。體積太小可能生長很慢，或者不生長，但是在進行抗性篩選時，培養(yǎng)體體積要小些。愈傷組織繼代培養(yǎng)基和脫分化培養(yǎng)基的成分和激素條件，可能相同，也可能不同，因植物而異。由于長期繼代培養(yǎng)使內源激素含量增加，繼代培養(yǎng)基的激素種類和含量需要作適當的調整。3.無性系的建立從離體培養(yǎng)物上建立無性系，經常遇到變異、細胞分化能力喪失和出現玻璃苗等問題。對每一種植物的離體培養(yǎng)，需要通過大量的試驗，確定最佳培養(yǎng)條件，使之程序化，以便達到應用目的。建立無性系的途徑大致可用圖13—2表示。圖13—2 無性系建立示意圖4.生根從芽和嫩枝誘導生根的難易程度首先取決于植物的遺傳型。草本植物一般比木本植物容易。成年樹產生的芽和嫩枝，比幼態(tài)樹的生根困難。誘導生根通常在生根培養(yǎng)基上加入適量的生長素，如萘乙酸、吲哚丁酸、吲哚乙酸。有些植物可以在無激素培養(yǎng)基上生根。生根培養(yǎng)基可以和前培養(yǎng)基相同，也經常使用1/2、1/3或1/4濃度的高鹽培養(yǎng)基，或者總鹽濃度較低的培養(yǎng)基。鐵鹽有益于根的形成，一般維持原濃度。蔗糖對于生根是必要的，不同的植物需要量可能不同。一些難以生根的植物可以試用一些其它的方法：（1）用高濃度生長素溶液預處理若干小時，而后用無菌水洗凈接入無激素培養(yǎng)基；（2）使用濾紙橋或蛭石代替瓊脂作支持物誘導生根；（3）在生根培養(yǎng)基上添加一些附加物，如活性炭、B9、二甲亞砜、根皮苷、根皮酚等物質；（4）在試管中誘導休眠器官，如小塊莖、小球莖、地下莖等；（5）切割嫩枝直接進行扦插或水培等。5.移栽有的植物移栽比較容易，例如：蘆薈試管苗直接移入土中，成活率可達100%，而人參試管苗移栽目前尚未見有成功的報道。對于許多植物需要具體研究其特殊的移栽技術。（1）培養(yǎng)壯苗，移栽前進行鍛煉。（2）逐步過渡，先經過人工基質，如蛭石、砂粒、珍珠巖、焦渣、心土等，而后移入土壤。對于易感病的植物，人工基質可采用高溫滅菌、化學滅菌或藥劑滅菌。（3）選擇合適的移栽時期。許多木本植物和一部分草本植物，當根原基突起或形成幾毫米短根時移栽成活率最高。有的草本植物可進行二次生根誘導，在第一次生根老化后再誘導新根進行移栽。（4）控制移栽環(huán)境條件，保持高濕度和良好通風，避免陽光直射和溫度過大波動。有些植物需要模擬其生態(tài)環(huán)境。（5）病害及時防治。常見為立枯病，可用多菌靈等農藥對幼苗和基質進行定期噴灑。（6）進行試管苗嫁接。（二）培養(yǎng)基和環(huán)境條件1.培養(yǎng)基根據培養(yǎng)材料和培養(yǎng)目的，植物組織培養(yǎng)可以分為許多種類，如器官培養(yǎng)，莖尖培養(yǎng)，花藥和花粉培養(yǎng)，子房和胚珠培養(yǎng)，胚胎培養(yǎng)，胚乳培養(yǎng)，果實培養(yǎng)，細胞懸浮培養(yǎng)，分生組織培養(yǎng)，愈傷組織培養(yǎng)，原生質體培養(yǎng)和細胞融合等。不同植物不同種類的組織培養(yǎng)需要選用不同的培養(yǎng)基。目前可供植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基約有250余種。對于一般的試管繁殖，為了降低生產成本，有的采用簡化培養(yǎng)基，用食用糖代替試劑用蔗糖，用普通水代替蒸餾水配制培養(yǎng)基。靜置淺層液體培養(yǎng)比瓊脂固體培養(yǎng)可降低成本70—80%，目前已用于一些植物的快速繁殖。2.環(huán)境條件包括培養(yǎng)基酸堿度，培養(yǎng)溫度、光照條件和通氣條件等。一般植物組織生長的最適pH在5—6.5之間，固體培養(yǎng)基常用pH5.8，液體培養(yǎng)基常用pH5.0。培養(yǎng)溫度一般為20—28℃左右。高溫（大約為27℃）適合于熱帶品種，低溫（20℃左右）有利于高山植物的離體培養(yǎng)。在試管內形成鱗莖球莖、塊莖等休眠器官時，其萌發(fā)常需要低溫處理。愈傷組織培養(yǎng)一般可在暗中進行。對于光自養(yǎng)離體培養(yǎng)物培養(yǎng)、器官發(fā)育和植株形成需要光照。光照強度范圍300—10000lx，一般1000—3000lx。一般培養(yǎng)室可設計用自然光代替日光燈。一些研究表明，不同波長的彩色光對愈傷組織的建成和器官的分化表現一定的影響，而且隨植物種類和器官不同而異。光照時間因植物特性和實驗目的而定，可連續(xù)光照，或周期性光照10—16小時。塊莖和其它貯藏器官的形成可能需要較長的黑暗時期。研究花器官發(fā)生時需要根據植物特性控制光照時間。在固體培養(yǎng)基上通?？梢圆豢紤]空氣成分，雖然在培養(yǎng)過程中有乙烯產生。液體培養(yǎng)需要注意通氣。細胞懸浮培養(yǎng)一般采用振蕩法通氣。在器官分化時，可用轉床，使組織能間隔在液體培養(yǎng)基中生長。小體積的靜置淺層液體培養(yǎng)，培養(yǎng)時間需要縮短，大約四周繼代培養(yǎng)一次。為了保存繁殖材料，仍應采用固體培養(yǎng)。六、我國藥用植物離體培養(yǎng)再生植株研究概況在藥用植物栽培生產中，不少名貴藥用植物生長周期長，用常規(guī)育種需要很長時間，如人參、黃連等。有的藥用植物繁殖系數小，耗種量大，如貝母、番紅花等。有的因病毒為害而退化，影響產量和質量，如地黃、太子參等。一些價格昂貴的野生藥用植物資源極少，生長緩慢，如黑節(jié)草、霍山石斛等。一些進口南藥因種苗奇缺而影響擴大生產，如乳香、血竭等。為了應用植物生物技術對藥用植物進行品種改良、快速繁殖、種質保存和開展遺傳工程研究，藥用植物離體培養(yǎng)再生植株的研究和應用日益引起人們的興趣和重視。目前，離體培養(yǎng)的試管藥用植物已達百種以上，如：爵床科九頭獅子草（Peristrophe japonica），獼猴桃科中華獼猴桃（Actinidia chinensis）、中華獼猴變種（A.chinensis var.sp.）、硬毛獼猴桃（A.chinensis var.hispide）夾竹桃科長春花（Catharanthus roseus）、夾竹桃（Nerium indicum）、蛇根木（Rauwolfia serpertina），五加科刺五加（Acanthopanax senticosus）、人參（Panax ginseng）、竹節(jié)參（P.japonicus）、西洋參（P.quinquefolium）、三七（P.notoginseng），蘿摩科馬利筋（Asclepias curassavica）、印度娃兒藤（
4，野酸棗的經濟價值有多高怎樣人工培育
（孫國棟）一、培養(yǎng)再生植株的意義以植物組織培養(yǎng)為主要手段的植物生物技術，包括五個分支領域，即用離體技術改良植物品種，經濟植物的快速繁殖，超低溫種質保存，植物細胞的大量培養(yǎng)和植物遺傳工程。在藥用植物離體培養(yǎng)中，除了植物細胞的大量培養(yǎng)外，其余都涉及到再生植株的培養(yǎng)。和一般的植物不同，培養(yǎng)藥用植物再生植株需要注意藥用成分的變化。（一）快速繁殖通過離體技術大量培養(yǎng)再生植株可以達到快速繁殖的目的，主要用于：（1）自然繁殖率低的植物；（2）性狀不一致的雜合植物，（3）資源稀少的瀕危植物；（4）新培育的優(yōu)良品種；（5）優(yōu)良芽變品種和性狀好的優(yōu)選單株；（6）國外引入的少量植物材料；（7）育種過程中需要迅速擴大的某些自交系、原始材料、雜種子代；（8）組織培養(yǎng)或自然條件下獲得的三倍體與多倍體植物；（9）除去病原菌（真菌、細菌、病毒）的植物。快速繁殖技術能否應用取決于：（1）培養(yǎng)技術簡易、穩(wěn)定、完善；（2）成本低于常規(guī)方法；（3）具有一定的設備條件和技術力量；（4）市場需要，價格適宜。如羅漢果、石斛。（二）脫毒植株通過莖尖培養(yǎng)，或者通過花瓣培養(yǎng)和愈傷組織長期培養(yǎng)，獲得除去主要病毒的脫毒植株，用它作為母株繼續(xù)繁殖，可以得到大量無病毒種苗，用于大田生產，可以提高產量和質量，防止品種退化。如地黃、菊花。（三）種質保存在4℃低溫或在液氮的低溫中，植物組織和細胞的生活力可以長期保持?？捎糜诶鋬霰４娴闹参锊牧嫌校海?）莖尖和側生分生組織；（2）培養(yǎng)的植物細胞和胚狀體；（3）原生質體；（4）植物器官，如胚、胚乳、子房、花藥、花粉和種子等。冷凍保存植物材料，可以節(jié)省人力、地力和物力。便于地區(qū)間和國際間種質交流，通過試管繁殖提供育種的原始材料和無病毒種苗。（四）品種改良用離體技術改良植物品種的方法主要有：（1）通過花藥、花粉、未受精子房、胚珠等培養(yǎng)獲得單倍體植株，進行單倍體育種；（2）通過胚乳培養(yǎng)獲得三倍體植株，或在植物組織培養(yǎng)中，通過秋水仙或其它因素處理獲得多倍體植株；（3）通過體細胞無性系變異和細胞突變體篩選，以獲得具有優(yōu)良性狀的變異體和突變體；（4）原生質體培養(yǎng)和細胞雜交。不論采用何種育種技術，都必須誘導再生植株，并對后代進行鑒定。如人參、枸杞。（五）植物基因工程植物基因工程包括基因分離、載體系統和受體系統三個組成部分。它直接用控制性狀遺傳的基因作為操作對象，可以更精確地定向改良品種，目前分離和克隆的基因有20余種。載體系統主要在研究膿桿菌的Ti質粒系統（agrobacterium tumerfaciens T-DNA）。作為受體系統，可以采用原生質體，懸浮培養(yǎng)的細胞，愈傷組織離體的植物器官或整體植株。無論采用何種受體系統，都必須使轉化的細胞再生為完整植物，植株再生是植物基因工程的一個主要環(huán)節(jié)。如龍葵、菘藍。二、植株再生的基本原理生物界普遍存在再生現象，生物再生是自然選擇和人工選擇的結果。通常低等生物具有較強的再生能力，神經系統愈發(fā)達的高等動物，再生能力愈弱。在植物中，細胞、組織和器官，在離體培養(yǎng)條件下，可以生長和發(fā)育，形成完整植株。但是，不同種植物，或者同種植物不同品種，甚至同一植物不同組織和器官的細胞，再生能力也有差別。通常野生植物比栽培植物再生能力強，無性繁殖的植物強于種子繁殖的植物。植株再生的基礎在于細胞具有遺傳全能性，即每一個細胞含有產生一個完整有機體的全部遺傳信息，在適當的條件下，一個具有全能性的活細胞，其發(fā)育和分化，受其DNA上面的部分基因的被活化或阻抑所控制，一個細胞可以形成一個完全新的有機體。在離體培養(yǎng)物上再生植株，是離體培養(yǎng)物的細胞在各種環(huán)境因子的刺激和作用下，經過脫分化和再分化的結果?？赡苡捎谥参锛毎只癄顩r僅有相對的穩(wěn)定性，在離體培養(yǎng)中，特異化的細胞比較容易經脫分化恢復全能性，全能性的脫分化細胞經過再分化，產生完整的小植株。其中分化是植株再生的中心問題，和許多因素有關。植物激素是化學信使，作為基因表達的“效應子”，對RNA和蛋白質的合成起直接影響，在細胞脫分化和再分化的過程中起著重要的、有時是決定性的作用。雖然許多問題還非常不清楚，但是，植株再生的基本原理，目前認為是：（1）植物細胞全能性；（2）植物細胞的脫分化和再分化；（3）植物激素的平衡作用。這些基本原理，既是組織培養(yǎng)的一般指導原則，也是一些有待于深入研究的基本理論課題。三、植株再生的基本途徑從離體培養(yǎng)物上再生植株，存在兩條形態(tài)發(fā)生的基本途徑，即器官發(fā)生和胚胎發(fā)生。這兩種形態(tài)發(fā)生，有的經過愈傷組織階段，有的則直接產生于離體的母體組織。（一）器官發(fā)生器官發(fā)生途徑是通過器官分化形成完整植株，如貝母、藏紅花、紫背天葵、蘆薈。離體培養(yǎng)物的器官分化，包括不定芽、不定根、鱗莖、球莖、塊莖、原球莖以及花的形成。通過不定芽和不定根形成再生植株，有三種方式：（1）先形成芽，而后在芽上產生根；（2）先形成根，而后在根上產生芽；（3）在愈傷組織上同時產生芽和根，以后芽和根之間形成維管系統，連結成統一的軸狀結構。大多數情況為第一種方式。通過鱗莖、球莖、塊莖、原球莖等器官分化，也有不同情形。在植物組織培養(yǎng)中，雖然通過器官發(fā)生途徑再生植株的研究報道很多，但是有關基礎研究的資料仍很貧乏。大多數的研究繼續(xù)集中在外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件這三類因子調控作用的經驗性操作。在大多數情況下，人們僅能觀察已經表現出來的分化狀態(tài)，而很難跟蹤分化的過程。與形態(tài)發(fā)生的起源和方向有關的因素，目前的認識還很模糊，在這些因素中，包括有離體培養(yǎng)體系中各類物質的變化和相互作用，這些物質來自培養(yǎng)基、外植體及其培養(yǎng)過程中的代謝產物。在離體培養(yǎng)中，只有少量的細胞被啟動，而且起始是不同步的。Torrey（1966）提出擬分生組織假說，形態(tài)發(fā)生起始于愈傷組織中形成的分生細胞團，即擬分生組織。在培養(yǎng)體系內各種因子的作用下，由擬分生組織產生不同的原基，由于作用因子的性質不同，或者形成根，或者形成芽，或者發(fā)育為胚狀體。擬分生組織可能發(fā)生于組織與培養(yǎng)基的界面，其形成部位可能決定于從培養(yǎng)基向組織擴散的物質造成的生理梯度。Skoog和Miller等提出激素平衡假說，認為器官分化和細胞分裂素與生長素的比例有關。在大多數情況下，生長素與細胞分裂素的高比值，利于根形成，而相反的比值利于芽的發(fā)生。由于外植體內源激素的存在和抑制物質的累積，也有不少相反的情況。在實際應用這一原則時，有時需要增加或省略某一類植物激素，對下述因素作出必要的考慮：（1）植物激素的種類和組合；（2）植物激素的絕對濃度；（3）植物激素，主要是細胞分裂素和生長素的比例；（4）植物激素的順序效應；（5）其它因素的影響，如外植體、營養(yǎng)條件、碳源種類和濃度以及其它理化因素。（二）胚胎發(fā)生從胚胎發(fā)生途徑再生植株是先形成胚狀體，通過胚狀體萌發(fā)而形成完整的小植株。在高等植物中胚狀體的發(fā)生是一個普遍現象，現在已觀察到40多科150多種植物具有胚胎發(fā)生能力。關于胚狀體的概念，朱澂提出（1978），胚狀體是植物組織培養(yǎng)中起源于非合子細胞，經過胚胎發(fā)生和胚胎發(fā)育過程形成的胚狀結構。這個定義包括下列幾點含義：（1）胚狀體是組織培養(yǎng)的產物，只限于在組織培養(yǎng)范圍內使用，區(qū)別于無融合生殖的胚；（2）胚狀體起源于非合子細胞，區(qū)別于合子胚；（3）胚狀體的形成經歷胚胎發(fā)育的過程，區(qū)別于組織培養(yǎng)中分化的芽體。胚狀體的來源可以分為五類：（1）組織器官；（2）愈傷組織；（3）游離單細胞；（4）小孢子；（5）原生質體。其中有的起源于單細胞，有的起源于多細胞。胚狀體發(fā)生方式有兩種（Sharp et al，1980）：（1）直接發(fā)生：胚狀體形成不經過愈傷組織，直接來自離體培養(yǎng)組織中預決定胚性細胞（Preembryogenic determined cell）；（2）間接發(fā)生：胚狀體發(fā)生經過愈傷組織，從愈傷組織的誘導決定胚性細胞（Induced-embryogenic determined cell）發(fā)育而成。在培養(yǎng)體系有關因子的作用下，胚性細胞不斷分裂和增殖，形成胚性細胞團，進而發(fā)育成球形胚。通常胚性細胞較小，核大，細胞質濃厚，富有大的淀粉粒。球形胚組織可以與周圍組織分離，和合子胚發(fā)育過程相似，由球形胚發(fā)育分化為心形胚、魚雷形胚和具有子葉的成熟胚狀體。成熟的胚狀體形態(tài)和合子胚相似，具有胚根、胚芽和子葉。在分化培養(yǎng)基上，胚狀體像種子一樣萌發(fā)，胚軸伸長，葉片展開，發(fā)育根和形成葉綠素，多種器官再進一步生長形成小植株。由于胚狀體的形成，導致了人工種子的研制。從胚狀體發(fā)生到植株形成是一個連續(xù)過程，可以分為三個連續(xù)階段：（1）胚狀體的起源；（2）胚狀體的分化；（3）胚狀體萌發(fā)生長，形成小植株。在實際操作中，胚性細胞的誘導及其形成胚狀體的發(fā)育過程，可能在同一個培養(yǎng)基上形成，或者分別需要經過兩次培養(yǎng)。胚狀體形成綠色植株，則需要轉至分化培養(yǎng)基。如果培養(yǎng)基中的化學物質，主要是植物激素的不平衡。胚性細胞的分化和胚狀體的發(fā)育會受到抑制，而發(fā)生畸形胚性組織塊。這些畸形結構也可能具有胚胎發(fā)生潛力。胚胎發(fā)生與植物激素的關系因植物而異，可有幾種類型：1.專一性生長素型胚胎發(fā)生必須有生長素存在，其它植物激素的存在起抑制作用。這種類型又有兩種情況：（1）誘導胚性細胞必須有生長素，胚狀體形成和發(fā)育，則需要降低或者去除生長素，如胡蘿卜；（2）胚狀體誘導和發(fā)育可在同一生長素培養(yǎng)基上進行。如人參。2.非專一性生長素型胚胎發(fā)生需要生長素，其它植物激素，如細胞分裂素、赤霉素或脫落酸，在一定配比下有協同作用，如酸棗。3.非生長素型胚胎發(fā)生不需要生長素，可在細胞分裂素培養(yǎng)基上形成，如檀香。4.非激素型胚胎發(fā)生不需要植物激素，如曼陀羅花藥培養(yǎng)。胚狀體分化綠苗，通常需要降低或去除生長素，而細胞分裂素、赤霉素具有主要作用，如人參、西洋參。在體細胞胚胎發(fā)生中，還原態(tài)氮化物具有重要作用。還原態(tài)氮化物包括無機氮，如NH+4；有機氮化物，如氨基酸、酰胺、水解酪蛋白等。在通常情況下，還原態(tài)氮化物有利于胚狀體的發(fā)生，但是作用機理并不清楚，不同植物反應也不相同。許多研究表明，生長素和還原態(tài)氮化物的濃度比例可能起著重要作用。不同植物不同離體培養(yǎng)物再生植株的途徑可能不同，有的主要通過器官發(fā)生途徑，如煙草，有的很容易發(fā)生胚狀體，如胡蘿卜。但是許多植物再生植株，既可以通過器官發(fā)生途徑，也可以通過胚胎發(fā)生途徑，植物激素可以進行調控，如人參、西洋參等。通常誘導芽體分化需要細胞分裂素，誘導胚狀體發(fā)生則生長素起重要作用。在離體培養(yǎng)物上分化芽體和胚狀體，它們的主要區(qū)別在于：芽體具有單極性，與離體培養(yǎng)物有維管組織聯系，根和芽不同時產生；胚狀體具兩極性，即有根端（胚根）和莖端（胚芽），與離體培養(yǎng)物無直接聯系，是一個完整的植物體雛形。由于體細胞胚胎發(fā)生研究的進展，導致了人工種子的研制。四、植株再生的限制因素（一）植株再生的限制因素在離體培養(yǎng)物上再生植株，可以分為外植體、培養(yǎng)基和環(huán)境條件三類調控因子。在這三類因子中，雖然它們的作用都很重要，但是比較起來，植株再生能否成功，限制因素主要不在于培養(yǎng)基，而在于培養(yǎng)材料本身，即培養(yǎng)材料細胞全能性的表達程度。1.遺傳型（基因型）的影響不同植物種之間再生能力有很大差別，有的再生能力很強，如茄科、傘形科、十字花科等；有的再生比較困難，如豆科植物。同一種植物不同品種再生能力也有不同。由于遺傳型的影響，決定了植株再生的難易程度和應用前景。我們在研究五加科藥用植物人參、西洋參、三七和刺五加種胚培養(yǎng)再生植株時，得到下述結果：（1）在附加BA2mg/l+NAA0.5mg/l的培養(yǎng)基上，人參和西洋參種胚培養(yǎng)物可以直接啟動芽分化，轉入含有赤霉素的培養(yǎng)基上則形成不定芽，而三七和刺五加則無芽體分化。（2）在有生長素的培養(yǎng)基上，這四種藥用植物種胚培養(yǎng)物上均有胚狀體發(fā)生，但是對生長素的種類和濃度反應不同。在附加2，4-D0.5—1.0mg/l時，胚胎發(fā)生能力依次為：西洋參＞人參＞刺五加，而三七未觀察到胚胎發(fā)生。在含有IAA的培養(yǎng)基上，高濃度的IAA促進人參種胚體細胞胚胎發(fā)生，而三七和刺五加則以低濃度IAA為宜。（3）在上述的生長素條件下，人參和西洋參為間接胚胎發(fā)生，而三七和刺五加為直接胚胎發(fā)生。2.外植體的來源在離體培養(yǎng)中，可用作培養(yǎng)的材料很多，包括器官、組織，甚至單細胞。雖然植物細胞具有全能性，但它的表達可能僅限于某些特殊的細胞，這些細胞可能預先存在于外植體中，或者產生于培養(yǎng)過程之中。許多實驗表明，培養(yǎng)材料的特性，不僅影響再生的可能性，而且影響植株增長速率和植株的品質。在選用培養(yǎng)材料時可以觀察到，分生組織易于分化，子葉基部再生較強，成年樹木的葉片，可能逆轉性較差，細胞全能性難以表達。我們在研究西洋參離體培養(yǎng)再生植株時，不同外植體來源的愈傷組織，細胞全能性的表現程度不同（表13—10）。表13—10 西洋參不同外植體愈傷組織細胞全能性的表現程度3.外植體的狀況外植體的發(fā)育階段和年齡，外植體內源激素和生理狀態(tài)（取材季節(jié)），外植體大小，外植體的預處理，以及母體植株的質量等均影響植株再生的能否成功。在選擇外植體時，需要了解植物的生物學特性。（二）外植體的種類和選用在離體培養(yǎng)中，可供外植體的材料多種多樣，可以根據研究目的、再生途徑和實驗經驗進行選用。1.帶芽的外植體包括莖頭、側芽、原球莖、鱗莖等，這類外植體產生的植株成功率較高，變異性較小，容易保持材料的優(yōu)良特性，通常用于快速繁殖和培養(yǎng)無病毒植株（莖尖培養(yǎng)）。在培養(yǎng)時，為了誘導莖軸伸長，在培養(yǎng)基中多附加有生長素和赤霉素；如果誘導腋芽生長以產生叢生芽，在培養(yǎng)基中常含有大量的細胞分裂素。2.由分化的組織構成的外植體包括莖段、葉片、根等營養(yǎng)器官；花莖、花瓣、花萼、花藥、子房，胚珠、果實等生殖器官。這類外植體在培養(yǎng)過程中通常形成愈傷組織，通過器官發(fā)生和胚胎發(fā)生途徑再生植株。通過器官發(fā)生途徑再生植株，通常選用在自然條件下能產生不定芽的器官組織，這要根據不同植物的特性加以選擇，例如蘆薈選用莖段，菊花選用花瓣，百合選用鱗片等。通過胚胎發(fā)生途徑，常選用胚、幼嫩花序、分生組織等作外植體。這類外植體再生植株變異性較大，可用于無性系變異和突變體篩選，或者用于單倍體育種，如花粉植株。3.由遺傳轉化的細胞構成的外植體主要是指冠癭瘤轉化系統和直接DNA轉化系統，用于植物遺傳工程。五、再生植株的培養(yǎng)方法（一）再生植株的培養(yǎng)步驟1.建立無菌培養(yǎng)物這一步驟包括選取外植體，材料表面滅菌和在培養(yǎng)基上接種培養(yǎng)。能否得到無菌培養(yǎng)物，首先決定于植物材料的狀況，應盡可能使用在培養(yǎng)室或溫室栽種的生長健康旺盛的材料。田間材料滅菌比較困難，常采用下述方法：（1）用抗菌素溶液和殺菌劑預處理植株；（2）用塑料袋包裹枝條；（3）采回枝條扦插，利用新生的芽；（4）對培養(yǎng)材料進行多次滅菌。有一些植物的外植體在接種后和培養(yǎng)過程中發(fā)生褐變，可以選用一些抗氧化劑、解毒劑或吸附劑加入到培養(yǎng)基中，如檸檬酸、抗壞血酸，及半胱氨酸、聚乙烯吡咯烷酮、二硫蘇糖醇、促長啉、氯胺丁、二乙基二硫代氨基甲酸酯、活性炭等，以改善褐變情況。2.愈傷組織的培養(yǎng)愈傷組織是植物組織培養(yǎng)中最常遇到的一個階段，為了快速繁殖遺傳性一致的優(yōu)良株系，使變異小于3%，需要盡量避免愈傷組織，然而在品種改良方面，誘導愈傷組織是有益的。愈傷組織通常產生于外植體傷口的表層細胞。愈傷組織的生長特性取決于植物材料、培養(yǎng)基和環(huán)境條件，從外植體到愈傷組織建立，大體上經歷誘導、細胞分裂和分化階段。在外界條件尤其是植物激素的作用下，少數細胞被啟動，新陳代謝加強，而進入活躍的細胞分裂，外植體細胞逆轉為分生組織，或脫分化為愈傷組織。愈傷組織的生長沒有明顯的極性，只有內外的生長陡度，外圍的細胞分裂和生長快于內部細胞。第三個時期，愈傷組織出現細胞分化和產生某些次生代謝產物。愈傷組織最重要的特征是可以通過器官發(fā)生或胚胎發(fā)生形成根、芽和胚狀體，進而形成小植株。愈傷組織通常表現為淡黃色、白色、綠色，有的含有花色素苷形成的顏色。愈傷組織有松散型和緊密型。同一來源的愈傷組織，在繼代培養(yǎng)中經過人工篩選，可以得到不同的細胞系，它們在細胞分化程度、顏色、生長速度、對營養(yǎng)條件和激素條件的要求、合成特殊物質的能力等方面有很大的差異。變異是愈傷組織另一個重要特征。這些變異有表現型變異和基因型變異?；蛐妥儺惪赡苡斜缎宰兓旧w畸變、基因序列變化。通過對有益變異的選擇可以用于品種改良。從外植體形成愈傷組織，與植物激素的關系大致有下述情況：（1）僅需要生長素；（2）僅需要細胞分裂素；（3）需要生長素和細胞分裂素；（4）不需要植物激素。在大多數情況下，生長素是誘導愈傷組織的主要因子。在培養(yǎng)過程中，由于營養(yǎng)逐漸耗盡，瓊脂失水逐漸變干，代謝產物累積而使毒性提高，愈傷組織培養(yǎng)一段時間需要轉移至新鮮培養(yǎng)基上進行繼代培養(yǎng)，在固體培養(yǎng)基上，一般4—6周繼代培養(yǎng)一次。轉移的培養(yǎng)體，大約5—10mm，重20—100mg左右（Street，1969）。體積太小可能生長很慢，或者不生長，但是在進行抗性篩選時，培養(yǎng)體體積要小些。愈傷組織繼代培養(yǎng)基和脫分化培養(yǎng)基的成分和激素條件，可能相同，也可能不同，因植物而異。由于長期繼代培養(yǎng)使內源激素含量增加，繼代培養(yǎng)基的激素種類和含量需要作適當的調整。3.無性系的建立從離體培養(yǎng)物上建立無性系，經常遇到變異、細胞分化能力喪失和出現玻璃苗等問題。對每一種植物的離體培養(yǎng)，需要通過大量的試驗，確定最佳培養(yǎng)條件，使之程序化，以便達到應用目的。建立無性系的途徑大致可用圖13—2表示。圖13—2 無性系建立示意圖4.生根從芽和嫩枝誘導生根的難易程度首先取決于植物的遺傳型。草本植物一般比木本植物容易。成年樹產生的芽和嫩枝，比幼態(tài)樹的生根困難。誘導生根通常在生根培養(yǎng)基上加入適量的生長素，如萘乙酸、吲哚丁酸、吲哚乙酸。有些植物可以在無激素培養(yǎng)基上生根。生根培養(yǎng)基可以和前培養(yǎng)基相同，也經常使用1/2、1/3或1/4濃度的高鹽培養(yǎng)基，或者總鹽濃度較低的培養(yǎng)基。鐵鹽有益于根的形成，一般維持原濃度。蔗糖對于生根是必要的，不同的植物需要量可能不同。一些難以生根的植物可以試用一些其它的方法：（1）用高濃度生長素溶液預處理若干小時，而后用無菌水洗凈接入無激素培養(yǎng)基；（2）使用濾紙橋或蛭石代替瓊脂作支持物誘導生根；（3）在生根培養(yǎng)基上添加一些附加物，如活性炭、B9、二甲亞砜、根皮苷、根皮酚等物質；（4）在試管中誘導休眠器官，如小塊莖、小球莖、地下莖等；（5）切割嫩枝直接進行扦插或水培等。5.移栽有的植物移栽比較容易，例如：蘆薈試管苗直接移入土中，成活率可達100%，而人參試管苗移栽目前尚未見有成功的報道。對于許多植物需要具體研究其特殊的移栽技術。（1）培養(yǎng)壯苗，移栽前進行鍛煉。（2）逐步過渡，先經過人工基質，如蛭石、砂粒、珍珠巖、焦渣、心土等，而后移入土壤。對于易感病的植物，人工基質可采用高溫滅菌、化學滅菌或藥劑滅菌。（3）選擇合適的移栽時期。許多木本植物和一部分草本植物，當根原基突起或形成幾毫米短根時移栽成活率最高。有的草本植物可進行二次生根誘導，在第一次生根老化后再誘導新根進行移栽。（4）控制移栽環(huán)境條件，保持高濕度和良好通風，避免陽光直射和溫度過大波動。有些植物需要模擬其生態(tài)環(huán)境。（5）病害及時防治。常見為立枯病，可用多菌靈等農藥對幼苗和基質進行定期噴灑。（6）進行試管苗嫁接。（二）培養(yǎng)基和環(huán)境條件1.培養(yǎng)基根據培養(yǎng)材料和培養(yǎng)目的，植物組織培養(yǎng)可以分為許多種類，如器官培養(yǎng)，莖尖培養(yǎng)，花藥和花粉培養(yǎng)，子房和胚珠培養(yǎng)，胚胎培養(yǎng)，胚乳培養(yǎng)，果實培養(yǎng)，細胞懸浮培養(yǎng)，分生組織培養(yǎng)，愈傷組織培養(yǎng)，原生質體培養(yǎng)和細胞融合等。不同植物不同種類的組織培養(yǎng)需要選用不同的培養(yǎng)基。目前可供植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基約有250余種。對于一般的試管繁殖，為了降低生產成本，有的采用簡化培養(yǎng)基，用食用糖代替試劑用蔗糖，用普通水代替蒸餾水配制培養(yǎng)基。靜置淺層液體培養(yǎng)比瓊脂固體培養(yǎng)可降低成本70—80%，目前已用于一些植物的快速繁殖。2.環(huán)境條件包括培養(yǎng)基酸堿度，培養(yǎng)溫度、光照條件和通氣條件等。一般植物組織生長的最適pH在5—6.5之間，固體培養(yǎng)基常用pH5.8，液體培養(yǎng)基常用pH5.0。培養(yǎng)溫度一般為20—28℃左右。高溫（大約為27℃）適合于熱帶品種，低溫（20℃左右）有利于高山植物的離體培養(yǎng)。在試管內形成鱗莖球莖、塊莖等休眠器官時，其萌發(fā)常需要低溫處理。愈傷組織培養(yǎng)一般可在暗中進行。對于光自養(yǎng)離體培養(yǎng)物培養(yǎng)、器官發(fā)育和植株形成需要光照。光照強度范圍300—10000lx，一般1000—3000lx。一般培養(yǎng)室可設計用自然光代替日光燈。一些研究表明，不同波長的彩色光對愈傷組織的建成和器官的分化表現一定的影響，而且隨植物種類和器官不同而異。光照時間因植物特性和實驗目的而定，可連續(xù)光照，或周期性光照10—16小時。塊莖和其它貯藏器官的形成可能需要較長的黑暗時期。研究花器官發(fā)生時需要根據植物特性控制光照時間。在固體培養(yǎng)基上通?？梢圆豢紤]空氣成分，雖然在培養(yǎng)過程中有乙烯產生。液體培養(yǎng)需要注意通氣。細胞懸浮培養(yǎng)一般采用振蕩法通氣。在器官分化時，可用轉床，使組織能間隔在液體培養(yǎng)基中生長。小體積的靜置淺層液體培養(yǎng)，培養(yǎng)時間需要縮短，大約四周繼代培養(yǎng)一次。為了保存繁殖材料，仍應采用固體培養(yǎng)。六、我國藥用植物離體培養(yǎng)再生植株研究概況在藥用植物栽培生產中，不少名貴藥用植物生長周期長，用常規(guī)育種需要很長時間，如人參、黃連等。有的藥用植物繁殖系數小，耗種量大，如貝母、番紅花等。有的因病毒為害而退化，影響產量和質量，如地黃、太子參等。一些價格昂貴的野生藥用植物資源極少，生長緩慢，如黑節(jié)草、霍山石斛等。一些進口南藥因種苗奇缺而影響擴大生產，如乳香、血竭等。為了應用植物生物技術對藥用植物進行品種改良、快速繁殖、種質保存和開展遺傳工程研究，藥用植物離體培養(yǎng)再生植株的研究和應用日益引起人們的興趣和重視。目前，離體培養(yǎng)的試管藥用植物已達百種以上，如：爵床科九頭獅子草（Peristrophe japonica），獼猴桃科中華獼猴桃（Actinidia chinensis）、中華獼猴變種（A.chinensis var.sp.）、硬毛獼猴桃（A.chinensis var.hispide）夾竹桃科長春花（Catharanthus roseus）、夾竹桃（Nerium indicum）、蛇根木（Rauwolfia serpertina），五加科刺五加（Acanthopanax senticosus）、人參（Panax ginseng）、竹節(jié)參（P.japonicus）、西洋參（P.quinquefolium）、三七（P.notoginseng），蘿摩科馬利筋（Asclepias curassavica）、印度娃兒藤（
5，歪棗怎樣育苗
他一般是把棗糊洗干凈之后，放在專用的育苗室中進行育苗，必須要浸泡一段時間，它才可以順利發(fā)芽的。需要越南的毛葉棗種子才能育苗，再嫁接蜜絲棗上去，我今年自己育有兩三千棵種苗，同時我也有十畝蜜絲棗成年樹，現在果子已經上市了。
6，軟棗苗生活習性
嫁接時間：獼猴桃的最佳嫁接期在6~7月，過早、過晚成活率都較低。嫁接方法：可采用插皮舌接、劈接、腹接、芽接等方法，以芽接和插皮舌接成活率為最高。嫁接后的管理。接芽萌發(fā)新葉展開后，在接口10厘米以上處剪砧。過早剪砧則砧木上易抽生新條影響接芽的發(fā)育。嫁接較遲的，可待來年春季發(fā)芽后剪砧，接芽萌發(fā)抽生枝條后，應設立支柱綁縛，以免折斷。1、芽接：在6月上旬至9月上旬均可進行。芽接時，選健壯的實生苗做砧木，用“t”字接法。先在接穗上選取飽滿的芽，削成盾形芽片。再在選好的砧木上離地面5厘米處劃一個“t”字形，將皮挑開，把盾形芽片插入，最后用塑料膜條縛緊，露出芽頭。一個月后若芽片仍是綠色，說明木質部已連接在一起，嫁接成功。這時剪去砧木上部，加強肥水管理，當年新芽可抽條，翌年便可成為商品苗。花期5～6月，果期9月。我國特產，主產黃河流域沖積平原，全國各地均有栽培。為我國主要果樹和木本糧食樹種。已有兩千年栽培歷史。果味甜，富含維生素C，可生食，又可制蜜餞和果脯，釀酒。果入藥能補脾胃、潤心肺、益氣養(yǎng)榮。木材堅硬致密，為制器具和雕刻用材?；ㄆ陂L，為優(yōu)良蜜源樹。其變種酸棗（var.spinosa）和棗的區(qū)別為：灌木或小喬木，核果小圓球形，果核亦近圓球形。喜光，適應性強，喜干冷氣候，也耐濕熱，對土壤要求不嚴，耐干旱瘠薄，也耐低濕。生長于海拔1700米以下的山區(qū)、丘陵或平原。棗樹長著小刺，四月里長葉，五月開白帶青的花，各處都有栽種。
7，有棗樹快速育苗的方法嗎
為了快速繁育優(yōu)質棗樹壯苗，當年播種當年嫁接、當年成苗的棗樹快速育苗技術。介紹如下: 1 整地作床 (1) 整地：秋冬季深翻育苗地30厘米，結合深翻每畝施入腐熟農家肥10米3和磷肥100公斤，放置待用。 (2) 作床：翌年2月中下旬，再淺耕育苗地一遍，每畝施入碳酸氫銨l00公斤，耙平。育苗采用高壟作業(yè)，壟高10厘米，寬50厘米;壟的長度原則上要便于作業(yè)，壟作好后，覆蓋地膜。 2 播種及砧木苗管理 (1) 播種：在整好的壟上，用利器刺破地膜，點播經過脫殼處理的酸棗仁，株行距15×(30～50)厘米，株距15厘米，壟上行距30厘米，壟間行距50厘米，每穴2～3粒，澆上水，然后用細土封穴。 (2) 砧木苗管理：及時除草和根據墑情澆水，結合澆水追施氮肥3～4次。 3 嫁接 嫁接一般在6～8月份進行，凡砧木粗度與接穗粗度相當即可嫁接，具體時間可根據實際情況分別對待，早接成活率高，利于培養(yǎng)壯苗。嫁接刀具是單面刀片，綁扎條用厚地膜。嫁接方法是頂端嫩枝嫁接法，即采用幼嫩的棗頭枝作接穗，在砧木上的幼嫩部位去頂后，縱切一刀，插入接穗。接穗剪取以一個接芽為宜，具體操作方法同春季劈接。綁條要綁緊下部接口，除葉柄外包嚴全部接穗。 4 接后管理 (1) 除萌：及時抹除砧木的萌芽，以減少水分、養(yǎng)分消耗和利于砧穗愈合。 (2) 解條：待接芽長到10厘米時，解除接口包扎物。 (3) 肥水管理：當接芽大部分萌發(fā)后，及時澆水、追肥。前期以氮肥為主，后期追施磷鉀肥。 總之，采用嫩枝頂端嫁接的方法繁育棗苗，較常規(guī)方法縮短了棗樹青苗周期，降低了生產成本，只要加強生產管理，就可實現當年播種、當年嫁接、當年成苗出圃
8，臺灣大青棗苗一般是怎么育苗出來的
臺灣青棗現在在廣西還是蠻多人種植的，臺灣大青棗苗生長速度快，當年種植當年掛果，即使到了7-8月份種植，當年仍可掛果，經濟效益還是不錯的。不過在種植選種上，如果你覺得麻煩直接青棗苗批發(fā)來種植，青棗苗批發(fā)不放心你就自己育苗來種也不錯，大青棗苗育苗方法如下：一、砧木培育 1、種子處理 選取當年充分成熟的野生種子，在播前用撲菌特（中日合資生產）1000倍液或70%甲基托布津1200倍液浸泡24小時后涼干備用。 2、整地播種 選擇土質疏松的園地耕翻整畦，畦面應整平整細，用水噴濕畦面，撒播種子須均勻（每1kg種子約1500粒，可播2㎡），播種后覆蓋1-1．5cm厚的細土，最后蓋上地膜，以促進萌芽和提高發(fā)芽率。夏季播種應地膜上加蓋一層稻草，待萌芽后及時掀開地膜通風，以免造成爛種爛芽。 3、適期移植 播種后2-3個月小苗有2-3片真葉時移栽成活率最高，小苗株行距應大于15cm。移栽后需遮蔭3-4天，保持土壤濕潤，如果是假植于營養(yǎng)袋的，營養(yǎng)袋周邊間隙要填土保濕。臺灣大青棗苗培育方法如下：種植時間以3-5月最適宜，視天氣而定。有水源的地方，全年都可種植。(一)植間距大青棗生長迅速，植株壽命長且多利用側枝斜生，樹冠面積大，定植距離以6米以上較佳，一般行株距6×5米。栽植太密，浪費種苗成本，田間作業(yè)困難。(二)栽植方法種植植穴直徑60-100厘米寬深，以腐熟堆肥20-30公斤加復合肥0.5公斤、鈣鎂磷肥0.5公斤、硫酸鎂0.2公斤，硼肥0.025公斤，小量生石灰與表土混合填滿踏實，然后定植壓緊，幼苗基部周圍做20公分淺盆狀，便利灌水，必要時基部包覆稻草，以防烈日蒸曬。做好排水，以免淹水，立支柱固定幼苗，避免風吹松動，影響生長。
9，棗樹可以種植嗎
看你是什么地方的,如果雨水多的地區(qū)是不能栽大棗的,棗樹的吸水能力特別強,雨水多,棗樹生長旺盛,抗寒能力低,另外枝干吸收過多的水,會將表皮掙裂而導致樹體死亡.另外,東北地區(qū)只有在朝陽地區(qū)和阜新地區(qū)才適合發(fā)展棗樹,再往北就不太適合了,北部地區(qū)栽的棗樹,即使不被凍死,但冬季氣溫過低,樹干勉強過冬,也不能開花結果.一、斷根育苗 早春化凍后，選擇品種好的棗樹作母樹，在其周圍挖溝斷根，距樹干2米左右，挖一道深、寬各30厘米左右的環(huán)狀溝，將生土熟土分開，邊挖邊切斷樹根，遇有直徑6厘米以上的根不要切斷，切斷后會傷害母樹，又不易起苗。挖好溝后，首先向溝內混施部分土雜肥，而后澆水，待水滲完填入熟土、生土。五月中旬以后，一個斷根上可抽出數條分蘗，幼苗長到35厘米左右時，選留1—2根健壯苗，其余剪掉。另在溝外35厘米的地方再挖第二道溝，可促使幼苗生根。移栽前要定期澆水、施肥、除草、滅蟲治病。兩年后樹苗可移植，移植時帶一段25厘米左右的母樹根，提高成活率?！ 《w圃育苗 選擇土質肥沃，能排能灌的地塊作苗圃，把當年自然生長的根蘗苗、斷根培育的苗，按合理的密度移植到苗圃，集中培育。這樣便于管理，產苗量多，苗木側根較多，移栽成活率高。 三、嫁接育苗 一般在4月中旬至5月中旬，把品種優(yōu)良的棗樹芽條接在酸棗樹苗上。嫁接的方法有劈接、嫩梢芽接、硬枝芽接、插皮接等方法。 四、種子育苗 從品質好的棗樹中篩選出有棗仁的棗核取出棗仁，放在25℃的溫水中浸泡一晝夜，撈出放在筐里，用濕布蒙蓋，種子的溫度保持在24℃左右，每天用25℃的溫水沖4次，3天后大部分發(fā)芽，第4天即可播種。育苗地要施足底肥，深耕細耙，開成深10厘米的溝，行距65厘米，溝內合理灌水，水滲完點播，株距20厘米，每穴放種3—4粒，然后用細土覆蓋將溝平好，并培成一個寬15厘米、高10厘米的小土堆，5日后平去土堆，一周后幼苗拱出地面。第三年春季即可移栽?！ ∥?、克隆育苗 克隆育苗是運用生物工程的系統技術培育樹苗的一種新方法，是延安大學生命科學學院經過幾年的研究和實驗并獲得成功的一種先進育苗法，并在產業(yè)化生產中推廣應用。該方法是以棗樹的莖段、莖尖為材料，通過熱脫毒和試管克隆相結合生產的優(yōu)質棗樹苗。2003年該方法培育的20多萬株棗苗，在陜北和山東省的十多個地區(qū)試栽，經過跟蹤調查表明移栽成活率高，長勢喜人?？寺棙淠壳耙言谘哟?、延長、黃陵等縣產業(yè)化生產中推廣應用，其育苗技術水平國際領先。
10，沙棗樹苗的種植
沙棗苗木既耐寒、耐旱, 又較耐鹽堿, 是新疆各地實施退耕還林、三北防護林、防沙治沙等林業(yè)重點工程的造林先鋒樹種, 每年需苗量很大?，F根據多年的實踐經驗, 總結出沙棗苗木繁育關鍵技術。
1 圃地選擇
選擇土層深厚、地勢平坦、背風向陽、排灌配套、交通便利、地下水位在0.5m 以下、土壤有機質1%以上、含鹽量0.8%以下的壤土或沙壤土作為圃地。
2 整地
耕翻前每667m2 撒施優(yōu)質有機肥3～4m3。耕深28～30cm, 積雪薄的地區(qū)必須進行冬灌。春季解凍后, 采用機力或人工耙地, 而后作畦。苗床寬3m, 長15～20m, 埂底寬0.5m, 埂頂寬0.2m, 床面達到“細、碎、凈、平、齊、松、墑”7 字標準。
苗期
在苗高15cm 以前, 原則上不灌水, 以中耕松土
蹲苗為主。苗期灌水易導致猝倒病的發(fā)生, 不灌水可
起到蹲苗的作用。苗期一般中耕松土2～3 次。
5.2 生長期
5.2.1 追肥
當幼苗高度達到10～15cm, 在行間開溝追施磷
酸二銨20kg/667m2 和尿素10kg/667m2, 將其拌勻撒
施溝內, 立即覆蓋并用腳踏實。第2 次追肥在封垅前
進行, 可追施尿素8～10kg/667m2。每次施肥后立即灌
水。此外, 為了促使植株健壯生長, 整個生長期可結
合用藥進行根外追肥2～3 次, 即每次噴農藥時加入
0.2%～0.4%磷酸二氫鉀100～150g/667m2。
5.2.2 灌水
第1 水在追肥后進行, 南疆在5 月上、中旬; 北
疆在6 月1 日前后澆第1 水, 以后可每隔15～25d
澆1 次水。為了增強苗木抵強抗力, 南疆8 月20 日
左右、北疆8 月10 日左右灌1 次水, 在這之后50～
60d 內原則上停止?jié)菜? 以鍛煉苗木。
5.2.3 間苗
為了培育優(yōu)質苗木, 子葉期就應開始間苗, 至苗
高2～3cm 時結束間苗。間苗后保持苗帶寬7～10cm,
苗間距2～3cm。
5.2.4 定苗
當苗高5～6cm 時應及時定苗, 定苗后苗間距4～
5cm。定苗應遵循去弱留強、去密留稀、去病蟲苗留
健壯苗的原則。通過間苗、定苗, 每667m2 保苗株數
在3.5 萬～4.0 萬株之間。
5.2.5 中耕鋤草
中耕鋤草多在前期進行, 一般每年3～5 次。
5.2.6 病蟲害防治
危害沙棗苗的主要病蟲害有: 猝倒病、銹病、霉
污病等。( 1) 猝倒病: 主要危害幼苗。防治方法: 用
30%瑞苗清水劑進行床土消毒; 用75%敵克松可濕
性粉劑拌種; 發(fā)病初期噴施20%龍克菌懸浮劑500
倍液或根病清1 500～2 000 倍液;( 2) 銹病: 多在苗
中、后期發(fā)生。防治方法: 發(fā)病初期( 有中心病株出
現) , 立即噴施15%粉銹寧可濕性粉劑800～1 000 倍
液, 或75%百菌清可濕性粉劑500～600 倍液, 7～10d
噴施1 次, 連噴2～3 次;( 3) 霉污病: 植株莖、葉布滿
霉粉狀物。防治方法: 霉污病菌是一種寄生菌, 依靠
蚜蟲、紅蜘蛛的排泄物而生活。防治蚜蟲可噴施
10%砒蟲靈可濕性粉劑2 500 倍液; 防治紅蜘蛛可
噴施100%石蠟油800～1 000 倍液。
5.2.7 修剪
田間苗木生長過稀處, 因營養(yǎng)豐富, 植株生長較
壯, 中、下部枝條多且粗壯, 影響打捆運輸。生長中、
末期應把這些枝條剪除, 以利通風透光。
6 苗木出圃
為保證起苗根系質量并提高起苗工作效率, 必
須澆透“起苗水”。起苗采用雙側起苗法: 先用鐵鍬
在株行的一側切挖, 再挖另一側, 然后用腳將苗按同
方向踩倒后拾苗成堆。苗木規(guī)格要達到主根長20cm
以上、側根長15～20cm。
6.1 分級打捆
把苗木按要求分級后, 每100 株打捆, 剔除病蟲
株、干枯株和等外株, 打捆一定要緊實。
6.2 隨時假植
起苗打捆后要進行假植, 假植坑應挖在便于裝
車外運處。假植坑的規(guī)格為: 深0.6～0.8m, 寬2～3m,
長度不限。假植時, 捆斜放, 根向下, 每碼1 層培1 層
濕土, 培土高度為株高的1/2 或2/3, 嚴防根系失水。
6.3 越冬假植
如果沙棗苗木秋季不種植, 必須進行越冬假植。
應注意以下3 點:( 1) 在假植坑內一定要投放鼠藥;
( 2) 培土方法同隨時假植, 但培土應厚一些, 上方還
要用黑塑料薄膜覆蓋, 以防水分散失, 中間須豎葦把
通風;( 3) 來年苗木出坑后, 若發(fā)現根系有發(fā)霉現象,
必須對根系進行消毒。生活史及習性 年生1代，以成蟲在落葉、雜草、樹皮縫及樹干上枯卷葉內越冬。翌年3月氣溫達6℃時開始活動。4月上旬至6月上旬交配產卵，交配產卵多在早晨和傍晚，萌芽期卵各產于芽上，數粒在一起，展葉后多產于葉背，卵一端插入葉肉內。5月上旬開始孵化，下旬為盛期。若蟲期45～50天，5齡若蟲為害最重，蟲口密度大時，排出的蜜露使枝葉發(fā)亮。6月中至7月羽化。成蟲壽命長達一年左右，白天群集葉背為害，至10月下旬氣溫達0℃以下時，始進入越冬。天敵有花蝽、瓢蟲、草蛉、薊馬等。
