買正宗三七，就上三七通
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三七皂苷r1溶于pbs嗎，血栓通對(duì)肺癌患者有什么療效 尋求答案 知道的告訴下

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本文目錄一覽血栓通對(duì)肺癌患者有什么療效尋求答案知道的告訴下2，三七皂苷R1的三七皂苷R13，烯烴熱的高錳酸鉀水溶液反應(yīng)4，三七總皂苷簡(jiǎn)介5，PPO材料與什么油料會(huì)起反應(yīng)6，在酸性溶液中PbO2NaBiO3是強(qiáng)氧化劑都能把Cl氧化成Cl2……

本文目錄一覽

1，血栓通對(duì)肺癌患者有什么療效 尋求答案 知道的告訴下

血栓通的適應(yīng)癥為：視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞、眼前房出血、青光眼、腦血管病后遺癥的治療，也可用于治療病毒性肝炎。 對(duì)肺癌沒有療效。
血栓通主要成份含三七總皂苷，三七總皂苷中含多種單體皂苷成份，其中人參皂苷rg1、人參皂苷rb1、三七皂苷r1含量較多。人參皂苷rg1、三七皂苷r1具有抗血小板聚集、抗血栓形成、保護(hù)腦神經(jīng)的作用。而人參皂苷rb1等二醇皂苷主要為消炎、止痛作用。只有輔助的功效,治癌還是要有針對(duì)性的方案.

三七皂苷r1溶于pbs嗎

2，三七皂苷R1的三七皂苷R1

（Notoginsenoside R1）【產(chǎn)品名稱】三七皂苷R1 【英文名稱】Notoginsenoside R1【別名】【分 子 式】C47H80O18 【分 子 量】933.131【C A S 號(hào)】80418-24-2【化學(xué)分類】Saponins皂苷類【來 源】Panax notoginseng (Burk.) F.H.Chen【規(guī) 格】>95% >98%【性狀】white powder 別名：開化三七、人參三七、田七、金不換、盤龍七來源：三七Panax notoginseng( Burk.)F.H.Chen的干燥根及根莖【藥材提取和對(duì)照品溶液的配制】藥材的提?。壕芊Q取本品粉末（過四號(hào)篩）0.5678g，精密加入甲醇50ml，稱定重量，放置過夜，置80℃水浴上保持微沸2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。對(duì)照品溶液的制備：分別精密稱取人參皂苷Rgl對(duì)照品、人參皂苷Rbl對(duì)照品和三七皂苷R1對(duì)照品14.7mg，13.2mg和8.0mg，置10ml容量瓶中加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取以上三種對(duì)照品加流動(dòng)相制成每1ml含人參皂苷Rg1 0.18mg，人參皂苷Rb1 0.16mg、三七皂苷R1 0.10mg的混合溶液即得。 色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18150 x 4.6mm, 5ym進(jìn)樣量：20yl檢測(cè)波長：203nm柱溫：25.0℃流動(dòng)相：0--12mm 乙腈：水=19：81，12—60min乙腈：水=（19一36）：（81～64）方法來源：《中國藥典》 2005版對(duì)照品含量：人參皂苷Rg1 99.0%、人參皂苷Rb1 99.4%、三七皂苷R1 99.0%儀器；Agilent 1200配置：四元梯度泵（帶真空脫氣），DAD檢測(cè)器，柱溫箱，自動(dòng)進(jìn)樣器。 外標(biāo)法計(jì)算對(duì)照藥材中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1總含量為9-31%，分別以人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1和三七皂苷R1為對(duì)象，拖尾因子為：0.98、1.07和0.98，柱理論塔板數(shù)分別為：3321、3840、2987。

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3，烯烴熱的高錳酸鉀水溶液反應(yīng)

R1-CH=CH-R2+MnO4-+H+->R1-CHO+R2-CHO+H2O+Mn2+
乙烯和高錳酸鉀乙烯跟的稀溶液在較低溫度下反應(yīng)，在雙鍵上加兩個(gè)，生成，利用紫紅色褪去作定性檢驗(yàn)，如果反應(yīng)條件猛烈，則生成的進(jìn)一步氧化，導(dǎo)致碳-碳鍵斷裂，生成和二氧化碳。反應(yīng)式如下：ch2==ch2+mno4-(離子帶一個(gè)單位，上標(biāo))+h2o---->ho-ch2-ch2-oh+mno2----->hcooh+co2

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4，三七總皂苷簡(jiǎn)介

目錄 1 拼音 2 英文參考 3 三七總皂苷藥典標(biāo)準(zhǔn) 3.1 品名 3.2 來源 3.3 制法 3.4 性狀 3.5 鑒別 3.6 檢查 3.6.1 干燥失重 3.6.2 熾灼殘?jiān)? 3.6.3 溶液的顏色 3.6.4 蛋白質(zhì) 3.6.5 鞣質(zhì) 3.6.6 樹脂 3.6.7 草酸鹽 3.6.8 鉀離子 3.6.9 重金屬及有害元素 3.6.10 樹脂殘留 3.6.11 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 3.6.12 對(duì)照品溶液的制備 3.6.13 供試品溶液的制備 3.6.14 測(cè)定法 3.6.15 異常毒性 3.6.16 熱原 3.7 指紋圖譜 3.8 含量測(cè)定 3.8.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 3.8.2 對(duì)照提取物溶液的制備 3.8.3 供試品溶液的制備 3.8.4 測(cè)定法 3.9 貯藏 3.10 制劑 3.11 版本 4 三七總皂苷說明書 4.1 藥品名稱 4.2 英文名稱 4.3 三七總皂苷的別名 4.4 分類 4.5 劑型 4.6 三七總皂苷的藥理作用 4.7 三七總皂苷的藥代動(dòng)力學(xué) 4.8 三七總皂苷的適應(yīng)證 4.9 三七總皂苷的禁忌證 4.10 注意事項(xiàng) 4.11 三七總皂苷的不良反應(yīng) 4.12 三七總皂苷的用法用量 4.13 三七總皂苷與其它藥物的相互作用 4.14 專家點(diǎn)評(píng) 1 拼音 sān qī zǒng zào gān 2 英文參考 Panax Notoginsenosidum 3 三七總皂苷藥典標(biāo)準(zhǔn) 3.1 品名 三七總皂苷 Sanqi Zongzaogan NOTOGINSENG TOTAL SAPONINS 3.2 來源 本品為五加科植物三七Panax notoginseng （Burk） F．H. Chen.的主根或根莖經(jīng)加工制成的總皂苷。 3.3 制法 取三七粉碎成粗粉，用70%的乙醇提取，濾過，濾液減壓濃縮，濾過，過苯乙烯型非極性或弱極性共聚體大孔吸附樹脂柱，用水洗滌，水洗液棄去，以80%的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，脫色，精制，減壓濃縮至浸膏，干燥，即得。 3.4 性狀 本品為類白色至淡黃色的無定形粉末；味苦、微甘。 3.5 鑒別 取本品，照[含量測(cè)定]項(xiàng)下的方法試驗(yàn)，供試品色譜圖中應(yīng)呈現(xiàn)與三七總皂苷對(duì)照提取物中三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd色譜峰保留時(shí)間相同的色譜峰。 3.6 檢查 3.6.1 干燥失重 取本品，在80℃干燥至恒重，減失重量不得過5.0%（2010年版藥典一部附錄Ⅸ G）。 3.6.2 熾灼殘?jiān)? 不得過0.5%（2010年版藥典一部附錄Ⅸ J）。 3.6.3 溶液的顏色 取本品適量，加水制成每1ml含三七總皂苷25mg的溶液，與黃色4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液（2010年版藥典一部附錄ⅪA）比較，不得更深。有關(guān)物質(zhì)（注射劑用） 3.6.4 蛋白質(zhì) 取本品50mg，加水1ml溶解，依法檢查（2010年版藥典一部附錄Ⅸ S），應(yīng)符合規(guī)定。 3.6.5 鞣質(zhì) 取本品50mg，加水1ml溶解，依法檢查（2010年版藥典一部附錄Ⅸ S），應(yīng)符合規(guī)定。 3.6.6 樹脂 取本品250mg，加水5ml溶解，依法檢查（2010年版藥典一部附錄Ⅸ S），應(yīng)符合規(guī)定。 3.6.7 草酸鹽 取本品200mg，加水4ml溶解，依法檢查（2010年版藥典一部附錄Ⅸ S），應(yīng)符合規(guī)定。 3.6.8 鉀離子 取本品0.1g，緩緩熾灼至完全炭化，再在500～600℃熾灼使完全灰化，依法檢查（2010年版藥典一部附錄Ⅸ S），應(yīng)符合規(guī)定。 3.6.9 重金屬及有害元素 照鉛、鎘、砷、汞、銅測(cè)定法（2010年版藥典一部附錄Ⅸ B）測(cè)定，鉛不得過百萬分之五；鎘不得過千萬分之三；砷不得過百萬分之二；汞不得過千萬分之二；銅不得過百萬分之二十。 3.6.10 樹脂殘留 照殘留溶劑測(cè)定法（2010年版藥典二部附錄Ⅷ P第二法）測(cè)定。 3.6.11 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以鍵合／交聯(lián)聚乙二醇為固定相的石英毛細(xì)管柱（柱長為30m，內(nèi)徑為0.25mm，膜厚度為0.25μm）；柱溫為程序升溫，起始溫度為60℃，保持16分鐘，再以每分鐘20℃升溫至200℃，保持2分鐘；用氫火焰離子化檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)器溫度300℃；進(jìn)樣口溫度240℃；載氣為氮?dú)?，流速為每分?.0ml。頂空進(jìn)樣，頂空瓶平衡溫度為90℃，平衡時(shí)間為30分鐘。理論板數(shù)以鄰二甲苯峰計(jì)算應(yīng)不低于40000，各待測(cè)峰之間的分離度應(yīng)符合規(guī)定。 3.6.12 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取正己烷、苯、甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯、苯乙烯、1,2二乙基苯和二乙烯苯對(duì)照品適量，加N,N二甲基乙酰胺制成每1ml中分別含20μg、4μg、20μg、20μg、20μg、20μg、20μg、20μg的溶液，作為對(duì)照品貯備液。精密吸取上述貯備液2ml，置50ml量瓶中，加25% N,N二甲基乙酰胺溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置20ml頂空瓶中，密封，即得。 3.6.13 供試品溶液的制備 取本品約0.1g，精密稱定，置20ml頂空瓶中，精密加入25% N,N二甲基乙酰胺溶液5ml，密封，搖勻，即得。 3.6.14 測(cè)定法 分別精密量取頂空氣體1ml，注入氣相色譜儀，測(cè)定，即得。 本品含苯不得過0.0002%，含正己烷、甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯、苯乙烯、1,2二乙基苯和二乙烯苯均不得過0.002%（供注射用）。 3.6.15 異常毒性 取本品，加氯化鈉注射液制成每1ml含三七總皂苷5.0mg的溶液，作為供試品溶液。取體重為17～20g小鼠5只，在4～5秒內(nèi)每只小鼠注射供試品溶液0.5ml于尾靜脈中，全部小鼠在給藥后48小時(shí)內(nèi)不得有死亡；如有死亡，另取體重為18～19g的小鼠10只復(fù)試，全部小鼠在48小時(shí)內(nèi)不得有死亡（供注射用）。 3.6.16 熱原 取本品，加氯化鈉注射液制成每1ml含50mg的溶液，依法檢查（2010年版藥典一部附錄XIII A），劑量按家兔體重每1kg注射0.5ml，應(yīng)符合規(guī)定（供注射用）。 3.7 指紋圖譜 取本品，照[含量測(cè)定]項(xiàng)下的方法試驗(yàn)，記錄色譜圖。 按中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)，供試品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜經(jīng)相似度計(jì)算，5分鐘后的色譜峰，其相似度不得低予0.95。 對(duì)照指紋圖譜 峰1：三七皂苷R1 峰2：人參皂苷Rg1 峰3：人參皂苷Re峰4：人參皂苷Rb1 峰5：人參皂苷Rd 3.8 含量測(cè)定 照高效液相色譜法（2010年版藥典一部附錄Ⅵ D）測(cè)定。 3.8.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以水為流動(dòng)相B，按下表中的規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；流速每分鐘為1.5ml;檢測(cè)波長為203nm;柱溫25℃。人參皂苷Rg1與人參皂苷Re的分離度應(yīng)大于1.5。理論板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。 時(shí)間（分鐘） 流動(dòng)相A（%） 流動(dòng)相B（%） 0～20 20 80 20—45 20→46 80→54 45～55 46→55 54→45 55～60 55 45 3.8.2 對(duì)照提取物溶液的制備 取三七總皂苷對(duì)照提取物適量，精密稱定，加70%甲醇溶解并稀釋制成每1ml含2.5mg的溶液，即得。 3.8.3 供試品溶液的制備 取本品25mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加70%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。 3.8.4 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照提取物溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。 本品按干燥品計(jì)算，含三七皂苷R1（ C47H80O18）不得少于5.0%、人參皂苷Rg1（C42H72O14）不得少于25.0%、人參皂苷Re（C48H82O18）不得少于2.5%、人參皂苷Rb1（C54H92O23）不得少于30.0%、人參皂苷Rd（C48H82O18）不得少于5.0%，且三七皂苷R1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd總量不得低于75%（供口服用）或85%（供注射用）。 3.9 貯藏 密封，置干燥處。 3.10 制劑 口服制劑 3.11 版本 《中華人民共和國藥典》2010年版 4 三七總皂苷說明書 4.1 藥品名稱 三七總皂苷 4.2 英文名稱 Panax Notoginsenosidum 4.3 三七總皂苷的別名 血栓通；田七人參總皂苷；田七人參總皂甙；血塞通；Panax Pseudoginseng 4.4 分類 神經(jīng)系統(tǒng)藥物 > 腦血管擴(kuò)張藥物 > 其他 4.5 劑型 針劑：100mg（2ml），250mg（5ml） 4.6 三七總皂苷的藥理作用 系由三七（Panaxnotoginreng）的葉中分離提取的三七總苷制成的注射劑，具有活血化淤、通脈活絡(luò)以及抑制血小板聚集和增加腦血流量的作用。對(duì)實(shí)驗(yàn)性血栓形成，抑制率達(dá)92.13%，且能顯著降低血液粘度及纖維蛋白質(zhì)含量，并能使全血凝固時(shí)間、凝血酶原時(shí)原時(shí)間、凝血酶時(shí)時(shí)間顯著延長。 4.7 三七總皂苷的藥代動(dòng)力學(xué) 急性毒性試驗(yàn)中，小鼠灌胃給藥的半數(shù)致死量（LD50）為16020±1508mg/kg，皮下給藥為594.52±15.54mg/kg。亞急性毒性試驗(yàn)中，家兔一天靜脈注射三七總皂苷110mg/kg，24天后對(duì)血象、肝腎功能等未見明顯影響，與對(duì)照組比較，其心、肝、腎、腸、腎上腺等實(shí)質(zhì)性器官亦未見明顯的形態(tài)學(xué)改變。 4.8 三七總皂苷的適應(yīng)證 缺血性腦血管疾病、腦出血后遺癥癱瘓以及視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞、眼前房出血、青光眼等，也可用于治療病毒性肝炎。 4.9 三七總皂苷的禁忌證 （尚不明確） 4.10 注意事項(xiàng) 不可用作滴眼。 4.11 三七總皂苷的不良反應(yīng) 偶見咽喉干燥、頭昏、心慌等現(xiàn)象，但停藥后可恢復(fù)正常。 4.12 三七總皂苷的用法用量 1.靜注：每次200～400mg，每天1次，以25%～50%葡萄糖注射劑40～60ml稀釋后靜脈緩?fù)啤? 2.靜脈滴注：每次200～400mg，每天1次，以10%葡萄糖注射劑250～500ml稀釋后靜脈滴注。10～15天為1個(gè)療程。 3.肌注：每次100～200mg，每日1～2次。 4.13 藥物相互作用 （尚不明確） 4.14 專家點(diǎn)評(píng)

5，PPO材料與什么油料會(huì)起反應(yīng)

PPO塑料即poly(phenylene oxide) ，聚苯醚塑料，可以與ABS,HDPE,PPS,PA,HIPS、玻璃纖維等進(jìn)行共混改性處理。它的流動(dòng)性差，為類似牛頓流體，粘度對(duì)溫度比較敏感，制品厚度一般在0.8毫米以上。極易分解，分解時(shí)產(chǎn)生腐蝕氣體。既然是醚，結(jié)構(gòu)中含有C-O-C，所以低級(jí)酯類都容易和它反應(yīng)，發(fā)生置換反應(yīng)。反應(yīng)類似于：R-O-R‘ + R1-C（=O）-O-R2 ——R1-C（=O）-O- R或者R1-C（=O）-O- R’至于是生成哪種形式，主要看反應(yīng)物的活性以及它的分子空間構(gòu)型，一般小分子的容易反應(yīng)，不受空間位阻效應(yīng)的影響。另外，根據(jù)相似相溶原理：無機(jī)物易溶于無機(jī)物中，有機(jī)物易溶于有機(jī)物中，PPO是有機(jī)物，它與有機(jī)物容易互溶

6，在酸性溶液中PbO2NaBiO3是強(qiáng)氧化劑都能把Cl氧化成Cl2寫出反

PbO2+4HCl=PbCl2+2H2O+Cl2NaBiO3+6HCl=BiCl3+NaCl+CL2+3H20堿性條件 CL2+PbCl2+4NaOH= PbO2+4NaCl+2H20Cl2+BiCl3+6NaOH=NaBiO3+5NaCL+3H2O
乙烯與高錳酸鉀反應(yīng)的化學(xué)方程式 首先說明，烯烴與強(qiáng)氧化劑（如酸性高錳酸鉀溶液）的反應(yīng)方程式不要求記憶掌握。 5 h2=ch2+12kmno4+18h2o==12mnso4+6k2so4+10co2+28h2o r-ch=ch2 →r-cooh+co2(條件：kmno4/h+） r1 r1 │ │ c=ch-r3 → c=o+hooc-r3 (條件：kmno4/h+） │ │ r2 r2

7，怎樣才能更好的治好腦血塞

血塞通注射液： [主要成份]三七總皂苷（其主要成份為：人參皂苷Rb1, 人參皂苷Rg1，三七皂苷R1）。 [性 狀]本品為淡黃色或黃色澄明液體。 [藥理作用]能增加腦血管流量，擴(kuò)張腦血管，改善血流動(dòng)力學(xué)，降低腦缺血腦組織*含量，對(duì)腦缺血后海馬CA1區(qū)的遲發(fā)性神經(jīng)元損傷有明顯的保護(hù)作用。能抑制血栓形成，提高T-PA活性。能抑制ADP引起的家兔血小板聚集，花生四烯酸誘導(dǎo)的血小板聚集。有延長凝血時(shí)間的作用，對(duì)缺氧所致的腦損傷具有保護(hù)作用。 [功能主治]活血祛瘀，通脈活絡(luò)，用于中風(fēng)偏癱，瘀血阻絡(luò)證；動(dòng)脈粥狀硬化性血栓性腦梗塞，腦栓塞，視網(wǎng)膜中央進(jìn)們靜脈阻塞見淤血阻絡(luò)證者。 [用法用量]靜脈注射：一次200—400MG，用5%--10%葡萄糖注射液250-500ML稀釋后緩緩滴注，一日一次，十五天為一療程，停藥1-3天后，可進(jìn)行第二療程。 [不良反應(yīng)]個(gè)別患者出現(xiàn)咽干、頭昏、心慌和皮疹，停藥后均能恢復(fù)正常，偶見過敏反應(yīng)。 [禁 忌]出血性腦血管病急性期禁用。人參、三七過敏患者禁用。 [注意事項(xiàng)]孕婦慎用。顏面皮膚潮紅，輕微頭脹痛不影響本品使用。偶有輕微皮疹出現(xiàn)，可繼續(xù)使用。若出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，應(yīng)立即停藥，并進(jìn)行相應(yīng)處理。糖尿病患者可用0.9%氯化鈉注射液代替葡萄糖注射液稀釋后使用。 [規(guī) 格]10ML：250MG [貯 藏]密封、避光、置陰涼處。 [包 裝]每盒5支，安瓿包裝。 [有 效 期]二年。

8，金不換的化學(xué)成份

三七中含有多種達(dá)瑪烷型四環(huán)三萜皂甙的活性成分。從根中分得人參皂甙（ginsenoside-Rb1、Rb、-Re、-Rg1、-Rg2、-Rh1，20-O-葡萄糖人參皂甙Rf（20-O-glucoginsenosideRf)，三七皂甙（notoginsenoside)-R1、-R2、-R3、-R4、-R6、-R7，絞股蘭甙（gypenoside)XV。從塊狀根莖中分得：人參皂甙-Rb1、-Rb2、-Rd、-Re、-Rg1和三七皂甙R1；從絨根中分得：人參皂甙-Rb1、Rg1、Rh1和達(dá)瑪-20-3β，12β，25-三醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖甙[dannar-20-ene-3β，12β，25-TCMLIBio 1-6-O-β-D-glucopyranoside]等。從蘆頭中分得：人參皂甙Rb1、Rd、Re、Rg1、Rh1，三七皂甙R1、R4。又從根的水深性部分中分得止血有效成分田七氨酸（dencichine)，又稱三七素，為一種特殊氨基酸，其結(jié)構(gòu)為β-N-草?；?D-α-β-二氨基丙酸（β-N-oxalo-D-αβ-diaminopropionic acid)，谷氨酸（glutamic acid)，精氨酸（arginine)，賴氨酸（lysine)，亮氨酸（leucine）等16種氨基酸，其中7種為人體必需的，總氨基酸的平均含量為7.73%。從絨根中分得共同酮類成分：槲皮素（quercetin)以及槲皮素和木糖（xylose)，葡萄糖（glucose)，葡萄糖醛酸（glucuronic acid)所成的甙。還有β-谷甾醇（β-sitosterol)，胡蘿卜甙（daucosterol)，蔗糖（sucrose)。從根中還得到具有活性的三七多糖A（sanchian-A)，系一種阿拉伯半乳聚糖（arabinogalactan)。又含鐵、銅、錳、鋅、鎳、釩、鉬、氟等無機(jī)元素。向左轉(zhuǎn)|向右轉(zhuǎn)

9，如何做好免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)

載玻片/蓋玻片處理　　聚醚酰亞胺或多聚賴氨酸在室溫下包被蓋玻片1小時(shí)。　　無菌水沖洗蓋玻片（3次 ，每次5分鐘）?！　】蓪⑸w玻片干完全干燥，并在紫外光下消毒至少4小時(shí)?！　≡诓Ｆ戏N植細(xì)胞，或準(zhǔn)備細(xì)胞離心涂片器，或做好涂抹準(zhǔn)備?！　×姿猁}緩沖液（ PBS ）進(jìn)行簡(jiǎn)短的沖洗?！　〉谝徊剑杭?xì)胞固定　　用預(yù)冷的甲醇、丙酮（ 1-10分鐘），或3-4 ％甲醛（PBS的pH值7.4）室溫（或者-20 ℃)固定細(xì)胞片15分鐘?！　∮妙A(yù)冷的PBS沖洗細(xì)胞片兩次。透化：如果目的蛋白是胞內(nèi)表達(dá)，透化細(xì)胞非常重要。注：丙酮固定標(biāo)本不需要透化?！　∮煤?.25% Triton X-100或100 μM 洋地黃皂苷 or 0.5% 皂苷的PBS室溫孵育標(biāo)本10分鐘。Triton X - 100是目前最流行的通透劑，可提高抗體的滲透程度。但這不適合與膜相連抗原的使用，因?yàn)樗鼤?huì)將膜破壞?！　BS清洗細(xì)胞片3次，每次5分鐘?！　〉诙剑悍忾]和孵育　　PBST孵育細(xì)胞（1 ％牛血清白蛋白），室溫30分鐘，以封閉抗體非特異性結(jié)合位點(diǎn)（封閉液也可以是1 ％明膠或10 ％的血清，此血清需來自二抗產(chǎn)生的物種體內(nèi)） ?！　〖尤胍豢乖跐窈袃?nèi)孵育細(xì)胞片（在使用含1% BSA PBST稀釋抗體的），室溫1小時(shí)或4 ℃過夜。　　緩慢倒出溶液，PBS清洗細(xì)胞片的3次，每次5分鐘?！　〖尤牒? ％BSA的二抗稀釋液，室溫避光孵育1小時(shí)（避光）?！　【徛钩龆谷芤海琍BS清洗3次，每次5分鐘（避光）?！　〉谌剑簭?fù)染　　在0.1-1 μg/ml Hoechst or DAPI (DNA染液)下孵育細(xì)胞1分鐘?！　BS清洗?！　〉谒牟剑悍馄陀^察　　滴加一滴封片劑封片劑質(zhì)，蓋上蓋玻片?！　∮弥讣子兔芊馍w玻片，以防止干燥和顯微鏡觀察時(shí)移動(dòng)。　　觀察后的細(xì)胞片可避光保存在-20或4°C。
請(qǐng)教培養(yǎng)懸浮細(xì)胞如何進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色將已經(jīng)消毒的蓋玻片置于6孔培養(yǎng)板中,按104-105/ml的細(xì)胞密度將細(xì)胞接種于培養(yǎng)板中進(jìn)行細(xì)胞爬片,培養(yǎng)6-12小時(shí),待細(xì)胞貼壁后,3-5天后進(jìn)行免疫細(xì)胞組織化學(xué)染色鑒定
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